1 原理及用途
本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测谷物、饲料等样品中的玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后,样本溶液中的玉米赤霉烯酮与金标抗体相结合,从而阻止金标抗体与纤维素膜上玉米赤霉烯酮偶联物结合。当样本溶液中的玉米赤霉烯酮含量大于检测检测线不显色,结果为阳性;当样本溶液中玉米赤霉烯酮含量小于检测检测线显紫红色,结果为阴性。
2 技术指标
2.1 试剂卡灵敏度:10ppb(ng/ml)
对样本的最终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。
2.2 样本检测下限:
谷物、饲料(不吹干)………………100ppb
谷物、饲料(吹干)…………………60ppb
粮油……………………………………100ppb
3 试剂盒组成
检测卡…………………………50个/盒
说明书…………………………1份
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器:均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:单道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 试剂:甲醇
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知:
实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
5.2 样本前处理步骤:
5.2.1 谷物、饲料
1)称取2g粉碎样品于50ml离心管中,再根据不同的检测限要求按下表加入甲醇,
检测下限 |
100ppb |
200ppb |
400ppb |
500ppb |
甲醇 |
3ml |
6ml |
12ml |
15ml |
振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)取0.15ml上清,加入0.85ml去离子水,混匀备用。
5.2.2谷物、饲料(部分强吸水性样本)
1)称取2g粉碎样品于50ml离心管中,加入5ml浓度为75%的甲醇,振荡5分钟后室温4000转/分离心5分钟。
2)取上清0.15ml,加入0.45ml去离子水,混匀备用。
稀释倍数:10倍 检测下限:100ppb
5.2.3 谷物、饲料(需吹干)
1)称取2g粉碎样品于50ml离心管中,加入4ml甲醇,振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)取1ml上层液体在50-60℃条件下用氮气或空气吹干;
3)加入0.45ml甲醇溶解剩下的残留物,剧烈振荡2分钟;
4)取0.15ml振荡后的液体,加入0.85ml去离子水,混匀备用。
稀释倍数:6倍 检测下限:60ppb
5.2.4粮油(菜油、麻油、色拉油、花生油等)
1)称取2g样本于50ml离心管中,加4ml正己烷和3ml甲醇,振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)取0.15ml上层液体,加0.85ml去离子水,混匀备用。
样本稀释倍数:10 检测下限:100ppb
6 实验步骤
6.1 撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
6.2 用配套吸管吸取已准备好的样本液体,缓慢、逐滴的(应避免泡沫产生)滴加2-3滴(约60ul)到加样孔(S)内。
6.3 室温下放置8-10分钟判断结果。超过10分钟的结果只能作为参考。
7 结果判断
阴性:在检测窗内,检测线(T)及对照线(C)同时出现色带。
阳性:在检测窗内,只有对照线(C)出现一条紫红色线。
失效:在检测窗内,对照线(C)不出现紫红色线。
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