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【原理】
提取DNA作为模板，在DNA 聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火和中温延伸的多次循环，使特异DNA 片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA 片段进行电泳、染色后，在紫外灯下，肉眼可见DNA 片段的扩增带。
【试剂盒组份】
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1. 裂解液
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8mL
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8. 阳性对照
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2. 蛋白酶K
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110μL
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9. 0.2 mL 薄壁PCR 管
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15个
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3. 抽提液
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8mL
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10. PCR 反应液A
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180μL
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4. 异丙醇
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7mL
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11. PCR 反应液B
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50μL
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5. 洗涤液
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12mL
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12. 50 倍TAE 电泳缓冲液
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20mL
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6. 无菌水
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500μL
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13. 染色液
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7. 阴性对照
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300μL
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10μL
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注：塑料袋内试剂（阳性对照、蛋白酶K、PCR反应液A和B）-20 ℃冻存，其他室温保存。
【操作方法】
一、样品制备
1 样品采集：病死或扑杀的猪，取大脑海马背侧皮层、中脑、脑桥、扁桃体、淋巴结等组织；待检活猪，用棉拭子取鼻腔分泌物，置于50%甘油生理盐水中，或用注射器取血5 mL，2～8 ℃保存。（要求送检病料新鲜，严禁反复冻融。）
2 样品处理：
2.1 组织样品的处理：称取组织0.1g于研磨器中磨碎，再加1mL生理盐水继续磨至无块状物；然后将样品转至1.5 mL灭菌离心管中，8000 rpm离心5 min，取上清100 µL，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
2.2 全血样品的处理：待血凝后取血清放于离心管中，8000 rpm离心5 min，取上清100 µL，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
2.3 阳性对照的处理： 混匀后取100 µL，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
2.4 阴性对照的处理： 混匀后取100 µL，加入500 µL裂解液和10 µL蛋白酶K，混匀后37℃温育1h。
二、病毒DNA的提取
1. 取已处理的样品、阴性对照和阳性对照，分别加入600µL抽提液（用抽提液之前不要晃动，不要吸到上层保护液），用力颠倒10次混匀，12,000 rpm 离心10min。
2. 取500µL上清置于灭菌离心管中，加入500µL异丙醇，混匀，置液氮中3min或-70℃冰箱中30min。取出样品管，室温融化，13,000 rpm 离心15min。
3. 弃上清，沿管壁缓缓加入1mL 洗涤液，轻轻旋转一周后倒掉，将离心管倒扣于吸水纸上1min，再将离心管真空抽干15min或37℃烘干。
4. 用30µL无菌水溶解沉淀，作为模板备用。
三、PCR
1. 反应体系：分别取16µL PCR反应液A（用前混匀）、2µL PCR反应液B（用前混匀）和2µL模板DNA，混匀。
2. 反应程序：在PCR仪上运行以下程序： 94 ℃ 3 min ；94 ℃ 30 s 、55℃ 30 s 、72 ℃ 30 s，35个循环；72 ℃延伸10 min。
四、电泳
1. 制胶：用50倍稀释的TAE电泳缓冲液配制1%琼脂糖凝胶。
2. 电泳：待胶凝固后，取5µL PCR扩增产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以5V/cm的电压于50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液中电泳。
3. 染色：取50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液30mL，加入10µL染色液，混匀后将胶浸泡30min，于紫外灯下观察结果。
【结果判断】
阳性对照出现400bp扩增带，阴性对照无带出现（引物带除外）时，实验结果成立。被检样品出现400bp扩增带为猪伪狂犬病毒阳性，否则为阴性。
【需用但未提供的材料】
组织研磨器、眼科剪、眼科镊、一次性注射器、琼脂糖、灭菌1.5mL 离心管和吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）。
【注意事项】
1．本试剂盒有效期为6个月，不要使用超过有效期限的试剂，试剂盒之间的组分不要混用。
2．所有试剂应在规定的温度储存，使用时拿到室温下，使用后立即放回。
3．注意防止试剂盒组分受污染。使用前将塑料袋内试剂瞬离15s，使液体全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取。
4．严格按试剂盒说明书操作可以获得的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。
5．所有接触病料的物品均应合理处理，以免污染实验室。
【生产企业】 广州健仑生物科技有限公司【联系电话】 13710007117 020-82574011 13802525278
【公司传真】 020-32206070
【电子邮件】 Service@jianlun.com
【腾讯 QQ 】 712628580 712628581 712628582
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【营销中心】 广州市中山大道中358号东溪商务大厦B座511室
【公司地址】 广州市天河区车陂第十五工业园一幢4067室
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编码
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产品名称
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产品规格
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检测方法
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|
猪病检测系列
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JL0101
|
伪狂犬病毒抗体检测试剂盒
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96T/盒
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ELIJL
|
|
JL0104
|
伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0102
|
伪狂犬病毒抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL0103
|
伪狂犬病毒抗体乳胶凝集试剂
|
100T/盒
|
乳胶凝集法
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|
JL0105
|
伪狂犬病毒PCR检测试剂盒
|
10T/盒
|
PCR
|
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JL0201
|
蓝耳病病毒抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0202
|
蓝耳病病毒抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL0203
|
蓝耳病病毒抗体乳胶凝集试剂
|
100T/盒
|
乳胶凝集法
|
|
JL0204
|
猪蓝耳病毒RT/盒-PCR检测试剂盒
|
10T/盒
|
PCR
|
|
JL0903
|
猪瘟病毒抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0902
|
猪瘟病毒抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL0904
|
猪瘟病毒抗原金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL0905
|
猪瘟病毒RT/盒-PCR检测试剂盒
|
10T/盒
|
PCR
|
|
JL0801
|
猪口蹄疫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0802
|
猪口蹄疫抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL1901
|
圆环病毒抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL1902
|
圆环病毒抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL1903
|
猪圆环病毒PCR检测试剂盒
|
10T/盒
|
PCR
|
|
JL0301
|
细小病毒抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0302
|
细小病毒抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
JL0303
|
细小病毒抗体乳胶凝集试剂
|
100T/盒
|
乳胶凝集法
|
|
JL0501
|
乙型脑炎抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0502
|
乙型脑炎抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
JL0503
|
乙型脑炎抗体乳胶凝集试剂
|
100T/盒
|
乳胶凝集法
|
|
JL0504
|
乙型脑炎病毒RT/盒-PCR检测试剂盒
|
10T/盒
|
PCR
|
|
JL0701
|
猪衣原体抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL0702
|
猪衣原体抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
JL1001
|
猪支原体抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL1002
|
猪支原体抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
JL1201
|
弓形虫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL1202
|
弓形虫抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
JL1301
|
旋毛虫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL1302
|
旋毛虫抗体金标检测条
|
50T/盒
|
金标试纸条
|
|
JL1303
|
旋毛虫抗原金标检测条
|
50T/盒
|
金标试纸条
|
|
JL1401
|
猪囊虫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL2001
|
家畜血吸虫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL2002
|
家畜血吸虫抗体金标检测卡
|
50T/盒
|
金标试纸条
|
|
JL2201
|
包虫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
JL2302
|
猪流感病毒抗原金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
广州健仑生物科技有限公司 电话： 020-82574011 手机： 13802429590 传真： 020-28216107
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|
编码
|
产品名称
|
产品规格
|
检测方法
|
|
禽病检测系列
|
|||
|
PA 0101
|
鸡新城疫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
PA0102
|
鸡新城疫抗原金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA0103
|
鸡新城疫抗体金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA0104
|
新城疫血凝及血凝抑制试验抗原
|
2ml
|
用于禽新城疫免疫效果的监测
|
|
PA0105
|
新城疫血凝及血凝抑制试验阳性血清
|
2ml
|
|
|
PA0106
|
新城疫病毒RT/盒-PCR检测试剂盒
|
10T/盒
|
PCR
|
|
PA0401
|
法氏囊抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
PA0402
|
法氏囊抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA0403
|
法氏囊抗原金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA0601
|
鸡传染性喉气管炎抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
PA0602
|
鸡传染性喉气管炎抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA0701
|
鸡减蛋综合症EDS76抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
PA0702
|
鸡减蛋综合症EDS76抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
PA0801
|
鸡病毒性关节炎抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
PA1001
|
禽流感抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
PA1002
|
禽流感抗原金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA1003
|
禽流感H5抗原金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
PA1004
|
禽流感H9抗体金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
广州健仑生物科技有限公司 电话： 020-82574011 手机： 13802429590 传真： 020-28216107
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编码
|
产品名称
|
产品规格
|
检测方法
|
|
犬检测系列
|
|||
|
OA0101
|
犬狂犬病抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
OA0102
|
犬狂犬病抗原金标检测卡
|
20T/盒
|
金标层析卡
|
|
OA0201
|
犬恶心丝虫抗体检测试剂盒
|
48T/盒
|
ELIJL
|
|
OA0301
|
犬肺吸虫病抗体检测试剂盒
|
48T/盒
|
ELIJL
|
|
OA0401
|
包虫病抗体检测试剂盒
|
48T/盒
|
ELIJL
|
|
OA0501
|
尿液快速检测试剂条
|
100T/盒
|
金标试剂条
|
|
OA0601
|
犬弓形虫抗体检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
OA0602
|
犬（猫）弓形虫抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
OA0603
|
犬（猫）弓形虫抗原检测试剂盒
|
96T/盒
|
ELIJL
|
|
OA0701
|
犬细小抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
OA0702
|
犬细小抗原金标检测卡
|
10T/盒
|
金标层析卡
|
|
OA0801
|
犬瘟热抗原金标检测卡
|
10T/盒
|
金标层析卡
|
|
OA1001
|
犬衣原体抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
OA1101
|
犬支原体抗体金标检测卡
|
40T/盒
|
金标渗滤卡
|
|
广州健仑生物科技有限公司 电话： 020-82574011 手机： 13802429590 传真： 020-28216107
|
|||
【联系电话】 13710007117 13802525278 020-82574011
【公司传真】 020-32206070
【电子邮件】 Service@jianlun.com
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