广州健仑生物科技有限公司

【药品名称】甲型流行性感冒病毒检测试剂盒（胶体金法）
【英文或拉丁名】Diagnostic Kit for Influenza type A (Colloid gold )
【汉语拼音】JIAXING LIUXINGXING GANMAOBINGDU JIANCE SHIJIHE（JIAOTIJIN FA）
【主要成分】
1. 检测板：20个，每个检测板在试剂部包被有胶体金标记抗甲型流感病毒单克隆抗体（鼠），在展开部包被有抗甲型流感病毒单克隆抗体（鼠）及抗鼠免疫球蛋白多克隆抗体（兔）。
2. 样本抽提液：2瓶，11ml/瓶，为含有表面活性剂的TRIS缓冲液并添加有防腐剂，可直接使用，贮存在2～30℃可稳定至有效期。
3. 灭菌棉棒20支。
4. 抽提用管子20支。
5. 滴头21个。
6. 立架1个。
【使用目的】
用于鼻腔抽吸液、鼻腔擦拭液和咽喉擦拭液标本中甲型流感病毒抗原的定性测定。
【试验原理】
流行性感冒是指由流感病毒引起的具有传染力的疾病，可引发肺炎或更严重的并发症。流感病毒的结构主要包括内部的核心和外部的病毒囊膜。流感病毒核心是由核蛋白卷曲包绕螺旋形核糖核酸（RNA）组成，核蛋白的抗原稳定，很少发生变异，具有型特异性。根据核蛋白抗原性的不同，可把感染人的流感病毒分为甲、乙、丙三型。本产品是利用能够特异性识别甲型流感病毒核蛋白的单克隆抗体，以免疫色谱法检测流感病毒核蛋白的试剂盒，本试剂盒仅对样品中的甲型流感病毒有反应，对乙型及丙型流感病毒均不反应，而且不能用于区分病毒感染的亚型。
本品是由样品滴下部、试剂部和展开部三部分组成的检测板，内藏长方块状的载体。其中，试剂部包含胶体金标记抗甲型流感病毒单克隆抗体（鼠）（以下将简称为胶体金标记抗体A）；展开部包含固定化的抗甲型流感病毒单克隆抗体（鼠）（以下简称为抗流感A抗体）及抗鼠免疫球蛋白多克隆抗体（兔）（以下简称为抗鼠免疫球蛋白抗体）。
检测板各部分的名称

样品从检测板的样品滴下部滴下后，胶体金标记抗体A被溶解，与样品中的甲型流感病毒抗原形成免疫复合体。免疫复合体因展开部的毛细管现象而移动，被判定部〔T〕中固定化的抗流感A抗体捕捉，于是在判定部[T]因胶体金的作用形成紫红色的条带。本试剂盒的这个紫红色条带可以肉眼确定，以判断样品中是否存在甲型流感病毒。
另一方面，无论样品中是否有甲型流感病毒存在，剩余的胶体金标志抗体A继续在展开部移动，在判定部[C]被固定化的抗鼠免疫球蛋白抗体捕捉，因胶体金而形成紫红色条带。这显示了胶体金标志抗体的正常移动。
【适用仪器】
无需其他仪器，产品开封后直接使用。
【样本要求】
1）鼻腔抽吸液的采集方法
抽吸器一侧的管子连接在抽吸泵上，另一侧的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。
2）鼻腔擦拭液的采集方法
将灭菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲数次，采集粘膜表皮。
3）咽喉擦拭液的采集方法

将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。采集时，要注意不要触碰到唾液。
*附带的棉棒适合用于鼻腔。用市售的棉棒采集咽喉擦拭液时，请用人造丝或涤纶材料的棉球棉棒。
样本处理上的注意点:
①采集的样本应尽早按下述调制方法进行样品处理。
②因去除细胞成分会降低灵敏度，所以在进行本测试前，不要离心分离。
③所有的样本都是有感染危险的，请在处理时小心注意。
【试验方法】
1.样本的调制方法
预先在附属的抽提用管子中加入0.5ml样本抽提液（到下方的基准线为止），放在立架上。
1.1鼻腔抽吸液
将鼻腔抽吸液0.5ml悬浊于运输培养基或2ml生理盐水中。
在已经加入了样本抽提液的抽提用管子中加入0.5ml悬浊液（到上方的基准线为止），充分混合后作为样品待测。
1.2咽喉·鼻腔擦拭液
将采集样本后的灭菌棉棒浸在抽提用管子中的样本抽提液中搅拌。从抽提用管子的外侧，用手指挤压灭菌棉棒数次，使样本抽提液充分浸透灭菌棉棒，然后拔出灭菌棉棒，绞出的液体作为样品待测。
2.检测操作方法
2.1将附属的滴头牢固地插入抽提用管子上端。
2.2捏紧抽提用管子，使样品滴下3滴到检测板的样品滴下部。
2.315分钟后观察检测板的判定部，按如下方法进行判定。
【试验结果的解释】
按操作方法使其发生反应，根据判定部显示的条带进行判定（从正上方往下观察判定部）。

超过了判定时间的检测板，因干燥等原因，有时结果会发生变化。请在样本滴下后60分钟以内进行判定。超过60分钟时，请用其他检测板重试。
【试验方法的局限性】
1. 如果检测结果为阴性同时病人有临床症状存在，建议使用病毒分离培养进行确认，并由主治医师综合判断进行确诊。阴性结果不能完全排除流感病毒感染。
2. 为防影响质量，请保存在2～30℃中，避免高温、潮湿及阳光直射。
3. 在使用附属的棉棒时，待样本抽提后，请迅速拔去棉棒。因棉棒长时间浸在样品中，中心轴会吸水。
4. 对于会堵塞过滤网的强粘性样品，请用样本抽提液稀释之后再使用。

【产品性能】
根据对本产品用法和用量的研究：
应用阳性参考品（3.0～3.9×10⁵ TCID₅₀/每次检测^*），弱阳性参考品（3.0～3.9×10⁴ TCID₅₀/每次检测）及阴性参考品（样本抽提液），进行灵敏度、特异性、重复性各种试验时，适合以下的规格。
^*TCID₅₀/每次检测
将样品调制成10ⁿ的稀释液系列，对MDCK（Madin Darby Canine Kidney）细胞有50%的细胞变性效果（CPE）时的稀释倍数，作为10ⁿ TCID₅₀/每次检测的病毒感染价。
1.测定范围
甲型流行性感冒病毒检测试剂盒（胶体金法）的检测灵敏度为3.0×10⁴ TCID₅₀/每次检测。
2.交叉反应试验
①甲型流感病毒
亚型的H1N1：5株、H2N2：3株、H3N2：7株，全被确认有反应。
②流感B病毒
流感B病毒9株，全都没有交叉反应。
与下述的病毒及细菌之间没有交叉反应。
①流感以外的病毒
Adenovirus Type 1～8,11,19,37, Coxsackie virus Type A16,B1～5, Cytomegalovirus, Echovirus Type 3,6,9,11,14,18,30, Enterovirus Type 71, HSV-1, Mumps virus, Parainfluenza virus Type 1～3, Poliovirus Type 1～3, Respiratory syncytial virus, Rhinovirus Type 1A,13,14
②衣原体及支原体
没有发现与Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma pneumoniae,有交叉反应。
③细菌
Acinetobacter baumannii,Bacteroides fragilis, Bordetella pertussis, Candida albicans, Candida glabrata,Cardiobacterium hominis,EikeneUa corrodens, Enterococcus gallinarum. Escherichia coil，Haemophilus phrophlus, aemophilus infiuenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus paraphrophilus, Kingella kingae, Klebsiella pneumoniae, Listeria monocytogenes, Moraxella catarrhalis, Neisseria gonorrhoeae Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus, pyogenes, Streptococcus agalactiae, Streptococcus sp. group C, G, F, Streptococcus mutans
3.与相关性有关的数据
根据在中国进行的临床研究，甲型流行性感冒病毒检测试剂盒（胶体金法）检测三种临床采集样本实验数据如下：
①鼻腔抽吸液

灵敏度=139/149×=93.3%
特异性=414/428×=96.7%
② 鼻腔擦拭液