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黄曲霉毒素B1检测卡
（胶体金法）
1 原理及用途
本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的黄曲霉毒素B1与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上黄曲霉毒素B1偶联物结合。当样本溶液中的黄曲霉毒素B1含量大于检测检测线不显色，结果为阳性；当样本溶液中黄曲霉毒素B1含量小于检测检测线显紫红色，结果为阴性。
2 试剂盒组成
检测卡…………………………50个/盒
说明书…………………………1份
3 需要的器材和试剂
3.1 仪器：均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
3.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl
3.3 试剂：甲醇，正己烷
4 样本前处理
4.1 样本处理前须知：
实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
4.2 配液：
配液1：样本提取液
70%甲醇，即V甲醇:V去离子水=7:3。
4.3 样本前处理步骤：
4.3.1 谷物、饲料
1）称取2g粉碎样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
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检测下限 |
10ppb |
20ppb |
50ppb |
100ppb |
|
样本提取液 |
2ml |
4ml |
10ml |
20ml |
振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。
2）取0.1ml上清，加入0.4ml去离子水，混匀备用。
4.3.2谷物、饲料（须吹干）
若要求检测下限为5ppb时，可按如下操作：
1）称取2g粉碎样本于离心管中，加入4ml样本提取液，振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟；
2）取1ml上层液体在50-60℃条件下用氮气或空气吹干；
3）先加入0.25ml 70%甲醇溶解剩下的残留物，剧烈震荡2分钟；再加入1ml去离子水，混匀备用。（注意：这一步甲醇与水的加液顺序不能颠倒）
稀释倍数：2.5倍 检测下限：5ppb
4.3.3粮油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）
1）称取2g样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
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检测下限 |
10ppb |
20ppb |
40ppb |
100ppb |
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样本提取液 |
2ml |
4ml |
8ml |
20ml |
然后加入8ml正己烷，振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。
2）去除上层液体，取0.1ml下层液体加入0.4ml去离子水，混匀备用。
5 实验步骤
5.1 撕开检测卡铝箔包装袋，取出检测卡，放于平整、洁净的台面上。
5.2 用配套吸管吸取已准备好的样本液体，缓慢、逐滴的（应避免泡沫产生）滴加2-3滴（约60ul）到加样孔（S）内。
5.3 室温下放置8-10分钟判断结果。超过10分钟的结果只能作为参考。
6 结果判断
阴性：在检测窗内，检测线（T）及对照线（C）同时出现色带。
阳性：在检测窗内，只有对照线（C）出现一条紫红色线。
失效：在检测窗内，对照线（C）不出现紫红色线
7 注意事项
7.1 过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。
7.2 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开，打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
7.3 不要触摸检测卡中央的白色膜面。
7.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。
7.5 待检样本溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。
8 贮藏及保存期
储藏条件：试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。
保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。
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