质粒中量提取试剂盒
QIAGEN Plasmid Midi Kit (25)
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QIAGEN Plasmid Kits通过重力流阴离子交换柱纯化转染级质粒DNA。该试剂盒可纯化获得至多100 μg质粒DNA。离心获得澄清的裂解产物和异丙醇沉淀。
详细信息
QIAGEN Plasmid Kit实验方案。
将中性细菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge内孵育,数秒内即可过滤澄清。然后将澄清的裂解物上样至阴离子交换纯化柱,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA会选择性地结合上去。利用中盐浓度的洗涤液去除RNA、蛋白质、代谢物及其他低分子量杂质,使用高盐缓冲液洗脱超纯的质粒DNA。利用异丙醇沉淀对DNA进行浓缩并脱盐,并通过离心收集。
性能
QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100阴离子交换柱高效纯化质粒DNA。只需25–100 ml培养基,即可纯化获得多达100 µg的高拷贝质粒DNA。(培养容量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染、克隆、测序和体外转录。
原理
QIAGEN-tips内的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA。纯化得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,通过离心收集。
技术参数
特点
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参数
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Applications
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Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.
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Culture volume/starting material
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25–100 ml culture volume
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Plasmid type
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High-copy, low-copy, cosmid DNA
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Processing
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Manual (centrifugation)
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Samples per run; throughput
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1 sample per run
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Technology
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Anion-exchange technology
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Time per run or prep per run
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150 min
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Yield
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<100 µg
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数量
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产品
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价格
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QIAGEN Plasmid Midi Kit (25)
25 QIAGEN-tip 100, Reagents, Buffers
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QIAGEN Plasmid Midi Kit (100)
100 QIAGEN-tip 100, Reagents, Buffers
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