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QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit

QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit可超快速、大规模纯化获得至多250 μg高纯度质粒DNA。通过真空装置可同时纯化至多24个样本，减少手动操作时间。低洗脱体积确保获得高浓度质粒DNA，无需乙醇沉淀，即可直接应用。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit含有新型的洗涤缓冲液，用于去除内毒素。纯化得到的质粒DNA适合多种应用，包括在敏感细胞株中转染。

详细信息

性能

QIAGEN Plasmid Plus技术可达到与阴离子交换技术相同的性能和品质。QIAGEN Plasmid Plus纯化柱的结合试剂确保得到高纯度质粒DNA。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit提供高产量的实验方案和额外缓冲液，得到多达250 μg的高纯度质粒DNA，无RNA、蛋白质和基因组DNA等污染物。

内毒素，又名脂多糖或LPS，在纯化质粒过程的裂解步骤释放，是革兰氏阴性菌如E. coli细胞膜的组成部分。内毒素能引起非特异性免疫应答，这是转染实验的非可控变量，影响实验结果和重复性，使其难以比较和解释。

该试剂盒提供的洗涤缓冲液可将内毒素水平降至1 EU/μg DNA以下。（依宿主菌、培养基和细胞密度的不同而不同，如果细胞密度较高，内毒素水平也略高，在1–3 EU/μg DNA范围内。）这使得到的质粒DNA适合多种应用，包括在敏感细胞系中转染。

原理

QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit进行大规模质粒纯化，方便快捷。设计的QIAGEN Plasmid Plus纯化柱和创新的结合试剂，使其只需简单的结合–洗涤–洗脱过程。QIAGEN Plasmid Plus Kits可在20分钟内实现快速大规模的midi质粒制备。得到高浓度质粒DNA，无需乙醇沉淀可直接用于下游各种应用。该质粒DNA适用于要求小体积量的应用。

该试剂盒也包含LyseBlue指示剂，用于指示的缓冲液混合状态。通过简单的颜色变化，就可避免常见的手动操作失误，防止细胞裂解不充分及SDS、基因组DNA和细胞碎片沉淀不完全。这种的缓冲液添加剂确保了细胞充分裂解和完全中和，使产量化。

操作流程

QIAGEN Plasmid Plus Kits提供的QIAfilter试剂条能快速澄清裂解液。一步即可将裂解液装入柱中，节约时间。使用真空装置（如QIAvac 24 Plus）抽吸澄清的裂解液及后续的洗涤缓冲液，使其流过QIAGEN Plasmid Plus离心柱。将膜洗涤和干燥后，即可通过离心获得高浓度DNA。

应用

QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit纯化得到的转染级质粒DNA适合多种应用，例如：

转染多数细胞系（敏感细胞系如Huh-7）

限制性酶切

克隆

体外转录和翻译

测序

技术参数