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河豚毒素（Tetrodotoxin,TTX）ELISA检测试剂盒说明书

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一、概要

河鲀毒素(Tetrodotoxin,TTX)是鲀鱼类（俗称河豚鱼）及其它生物体内含有的一种生物碱（氨基全氢喹唑啉型化合物），是自然界中所发现的毒性的神经毒素之一；其毒性比JU毒的氰HUA钠还要高1250多倍，0.5mg即可致人于死命。

本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,能限度地减少操作误差和工作强度。

二、试验原理

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中的残留物河豚毒素与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗河豚毒素的抗体，加入酶标二抗后，经TMB底物显色，样本吸光度值与其所含河豚毒素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中的河豚毒素含量。

三、适用范围

可定性、定量检测肌肉、肝脏、肠道、皮肤、卵巢（雄性为精束）等部分的河豚毒素残留量。

四、交叉反应率

河豚毒素…………………………………………………

五、使用单位需自备的设备及试剂

设备：

┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm

┅┅天平：感量0.01g

┅┅涡旋振荡器

┅┅离心机

┅┅电炉子或水浴锅

┅┅刻度移液管：10mL

┅┅聚苯乙烯离心管：50mL

┅┅微量移液器：单道10μL～100μL、100μL～1000μL

8道300μL

试剂：

----去离子水

----冰醋酸（乙酸，分析纯）

----氢氧化钠（分析纯）

六、提供的材料与试剂

组份名称 96T装量

酶标板 96T

标准品×6瓶* 1mL/瓶

河豚毒素抗试剂 6mL

河豚毒素酶标物 12mL

底物液A液 6mL

底物液B液 6mL

终止液 6mL

浓缩洗涤液(10×) 40mL

河豚毒素样品稀释液(4×) 40mL

*注：标准品浓度分别为0 ppb, 2ppb,5ppb,15ppb,45ppb,135ppb

十二、注意事项

1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、每加一种试剂前需将其摇匀。

4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6、试剂变质的迹象

发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

7、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min。反之，则减短反应时间。

十三、贮藏条件及保存期

贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。

保存期：该产品有效期为12个月。

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