●试剂组成
1.预包被板
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48T/96T;
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8. 阳性对照品(冻干品)
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1支;
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2.酶结合物(1号液)
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1支;
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9. 临界对照品(冻干品)
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1支;
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3.洗涤液(2号液)
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1支;
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10.阴性对照品(冻干品)
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1支;
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4.底物(3号液)
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1支;
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11.不干胶膜
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1/2片;
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5.显色剂(4号液)
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1支;
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12.自封袋
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1个;
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6.样本稀释液(5号液)
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1支;
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13.使用说明书
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1份;
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7.终止液(6号液)
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1支;
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●操作程序
1. 样本稀释:用样本稀释液(5号液)将待检血清按1:100稀释,如5ul血清+495ul样本稀释液,充分混匀。
阴、阳及临界对照每支加入300ul蒸馏水复溶,充分溶解;复溶后的对照直接加样,不用再稀释。
2. 加样反应:每次试验设设阴性、临界、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性、临界、阳性对照及样本稀释液100ul)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100ul。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,每次均需静置30秒,一次甩去拍干。
3. 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上
洗涤,拍干。
4. 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1
滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)。
●结果判断
以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。当待检样本孔A值大于等于阴性对照A值的2.1倍者判为阳性。如阴性对照A值低于0.05时,按0.05计算。
●注意事项
1.试剂盒于2-8℃保存,每次使用前应先平衡至室温。
2.未使用完的板条应密封保存。
3.试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。
4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。
5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清或血浆。任何样本都应视为传染源妥善处理。
6. 37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。
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